文件名	文件号	版本号
验证主计划
干热灭菌柜操作手册
除热原烘箱OQ方案/报告
PDA Technical Report 13	September/October 2001

6.0 标准操作规程

该方案的起草和执行中涉及下列标准操作规程：

文件名称	文件编号	版本号
干热灭菌柜操作SOP
KAYE验证仪操作SOP
KAYE验证仪校正SOP
SOP:除热原隧道/烘箱验证

7.0 设备描述

设备为双门电热鼓风干燥箱，通过电加热和热风气流循环，使烘箱腔体内获得均一的温度，从而满足间歇式的对实验室器具用品干燥、灭菌和除热原的要求。

烘箱内胆为不锈钢板制造，便于清洁，从而保持内腔的洁净。

待灭菌物品需以手工方式装入干燥箱腔室内的装载物车架上；车架上的搁板为打孔透气式，从而保证待灭菌物品与100级层流的热空气能充分接触。

灭菌器内室尺寸为：该烘箱腔体内尺寸为： XXXmm(高)x XXXmm(宽)x XXXmm(长)，容积为XXXL。

灭菌程序经历以下几个阶段：

1. 装料

2. 热除湿

3. 保温灭菌

4. 冷却降温

5. 出料

该干燥箱能在250℃进行灭菌、除热源程序操作。

该干燥箱内的装载如下：

最大装载：

装载物名称

转载物的数量

相应的灭菌程序（程序号）

最小装载：

装载物名称

转载物的数量

相应的灭菌程序（程序号）

（装载方式和程序参数需要基于某些研究试验或者基于经验预先批准。但在成功完成性能测试运行后，需要在设备操作的SOP中规定，并最终批准）。

8.0 验证测试计划

8.1 性能确认测试前，下列条件已满足（完成）：

· 设备上所有关键仪表（温度传感器、压力传感器等）在校正有效期内

· 设备的安装和运行确认已完成，可进行性能确认。

性能确认前的前提项目检查见附录2：“性能确认前预确认项目检查表”。

8.2 测试项目：

1) 空载温度分布测定

2) 最大装载时的满载热渗透

3) 最小装载时的满载热渗透

4) 内毒素挑战测试（内毒素指示剂）

上述每个验证项目均连续重复进行三次，以证明程序的重现性。

8.3 执行过程中记录要求

1) 结果的记录应按照“SOPXXXX：良好记录管理规程”进行

2) 在QA发放的已批的方案的受控表格上进行记录

3) 在测试数据表上，测试参数和可接受标准已预先规定，其他要素例如观察到的结果和签名将由人员现场执行时填写。

4) 观测结果记录为“是/否/不适用”，观测结果与接受标准符合时记录为“是”，不符合记录为“否”；如不适用记录为NA，写下不适用的适合的理由。

5) 如果执行中需要附上任何文件，文件应标上适当的文件号，在测试数据表上和所附的文件上都应写上同样的文件号。如果附上的是原始文件的复印件，应检查复印件的准确性，检查人/复核人应写上意见并签名。所有的附件应标识“方案号和附件01、02、03……等的系列号”。

如附件本身已有连续页码，不再需要另外编页；如果附件无连续页码，则在该附件的每一页上应标注页码“第x页，共y页”的连续和完整标示。

6) 验证执行前或执行期间，发现已批准的方案表格中存在错误，应记录为备注，而不能直接删除。该错误在审核已执行的验证方案时进行审核。

7) 备注和偏差将按照以下章节给出的要求记录。

8.4 偏差处理

1) 在执行期间，如果有备注的话，将记录在各自的数据表中。

2) 在审核所执行完的方案时，所有的备注将被检查，如果任何备注被认为不符合该测试的可接受标准，备注将上升为“偏差”

3) 评估偏差是否为GMP关键性。GMP非关键的偏差可说明理由，但GMP关键性偏差需要调查和采取适当的纠正措施。原因、调查和纠正措施有效性的检查都将记录在“偏差表”中，并将所有的偏差记录在附录“偏差汇总表”中。

9.0 验证执行步骤

9.1 电偶校验

1) 使用温度指示探头（热电偶）和验证仪（数据记录仪）来进行温度分布测定。

l 采用需要数量的温度探头（12支热电偶）以及验证仪，将探头编号。

l 按照NIST可追溯的标准使用验证仪和标准智能温度(IRTD)探头来校正热电偶。

l 温度分布测定前，在三点校正热电偶：200℃，设定点温度（250℃），280℃

l 完成PQ测试后，在设定点温度(250℃)再次确认校正热电偶。

2) 将验证仪的数据记录间隔设定为1分钟。

3) 将详细信息记录在附录1“验证仪热电偶校正结果”中。

9.2 空载热分布实验

1) 打开腔体门，按照附录2“腔体空载温度分布测定时热电偶放置方式”将探头均匀分布在除热原烘箱腔体内的不同区域。其中一个热电偶应放置在腔体本身温度控制探头的边上。

2) 保证所有的探头处于悬浮位置，不与金属表面接触（内壁、顶部、支撑架等）。

3) 探头分布好后关闭烘箱门，防止程序运行时漏风。

4) 将除热原烘箱设定在期望的温度，按照标准操作规程运行除热原烘箱。以1分钟的记录时间间隔进行温度分布测定。

5) 循环程序参数（恒温控制模式）：

除热原温度：250◦C；

除热原时间（保持时间）：45min

6) 如果程序运行结果满意，再连续运行两次程序。

7) 观察程序运行，将所有详细结果记录在附录5“空载温度分布测定结果”表内。

8) 测试完成后，审核和分析数据，确定除热原烘箱腔体内的热点和冷点。

9.3 最大装载满载热穿透实验

热渗透研究的目的是提供证据证明，最大装载时，装载物的所有部分都能达到设定的最低除热原温度，且装载物的所有部分都能达到除热原规范中规定的温度条件。

1) 选择最大装载作为最差状况进行确认测试。准备好日常除热原操作使用的物品，主要为实验室使用的小玻璃瓶和玻璃器具。

2) 将校验过的热电偶（12支）均匀放置在玻璃器具的内部，确保热电偶接触到器具的内表面（热电偶应读取器具内表面的温度而非空气的温度）。

3) 在附录6“装载方式、温度探头位置”中记录装载方式详细情况和所有热电偶的位置。

4) 在验证仪的程序中编辑计算F_H值，其中基准温度为250°C，z值为46.4°C，t₁为暴露开始的时间，t₂为暴露结束的时间：

设置验证仪（多点记录仪），计算整个周期的F_H值。

5) 将干燥箱设定在期望的温度和时间，按照标准操作规程运行除热原烘箱。以1分钟的时间间隔记录进行温度分布测定。

6) 循环程序参数（恒温控制模式）：

Ÿ 除热原温度：250◦C；

Ÿ 除热原时间（保持时间）：45min

7) 观察程序运行并在附录7“满载热渗透测试结果”表中记录数据。

8) 如果程序运行满意，再连续运行两次程序，以证明满载装载时灭菌器和程序的重现性。

9) 重复进行的测试应证明在装载物的最冷点能达到最低要求的FH值。

10) 程序运行结束后，取得验证仪生成的所有数据和报告，附在PQ验证报告后作为附件

9.4 内毒素挑战测试

内毒素挑战性试验与每次满载热渗透试验同时进行

1) 每次热渗透测试将预先准备12支内毒素指示剂。

2) 内毒素含量至少为10000 EU/瓶。将内毒素瓶放置于负载中的穿透热电偶旁。在图表中（附录6）记录内毒素瓶的位置。

3) 按照设备操作SOP运行除热原程序。

4) 在除热原程序运行结束后，通过无菌的方式获取暴露后的内毒素瓶。每个样品袋上贴上标签标示验证方案号、运行号、热电偶的位置编号、日期和操作员的姓名。向QC提交所有样品进行内毒素测试，同时递交有清楚标示的阳性对照瓶（即未暴露的）

5) 在附录8“内毒素挑战测试结果”表中记录测试结果。

10.0 合格标准

10.1 温度探头校正

1) 校正使用的参考仪表（智能标准温度探头，IRTD）应可追溯至NIST标准并在校准有效期内。

2) 将IRTD的校准证书附在PQ报告后。

3) 所有热电偶在温度分布测定前校准结果均应在仪器范围内

4) 至少有10根热电偶测试后的校准结果应在仪器范围内：

5) 热电偶和IRTD的温差应在±0.50℃范围内，并维持至少3分钟。

10.2 空载温度分布测定

1) 灭菌保持时间内，干燥箱腔体内各个位置的温度应在平均温度值的±10.0◦C范围内。

2) 腔体内本身的温度探头所指示和记录的温度与邻近验证仪探头之间的温度差应在±1.0◦C范围内。

3) 在灭菌保持阶段的任何时间，腔体控制探头和热电偶平均温度在腔体设定温度的±10⁰C范围内。

4) 在设定的灭菌温度段，所有探头应有至少45分钟的保持时间。

5) 在冷却阶段，HEPA过滤器前后的压差应在供应商指定的20Pa限度内。

10.3 最大和最小满载热渗透测试

1) 灭菌保持时间内，干燥箱腔体内各个位置的温度应在平均温度值的±10.0◦C范围内。

2) 腔体内本身的温度探头所指示和记录的温度与邻近验证仪探头之间的温度差应在±1.0◦C范

围内。

3) 在灭菌保持阶段的任何时间，腔体控制探头和热电偶平均温度在腔体设定温度的±10⁰C

范围内。

4) 在冷却阶段，HEPA过滤器前后的压差应在供应商指定的20Pa限度内。

5) 在暴露结束时每个穿透热电偶的最小FH累积值须大于等于45分钟（除热原保持时间）。

10.4 内毒素挑战测试

1) 接入了内毒素的玻璃瓶，暴露灭菌后，必须从初始浓度至少降低三个对数单位。

11.0 总结报告和结论

完成所有确认测试后，撰写一份报告，总结测试的结果。

在验证报告中总结和讨论以下内容：

l 暴露过程中最低温度处放置的热电偶位置

l 探头旁分布热电偶的读数与温度控制探头的读数间的差异

l 分布热电偶的温度范围

l 最大的温度分布差异

l 每个穿透热电偶在曝露结束时的最小FH累积值

l 内毒素的降低

成功完成PQ方案和报告后，所有提议的装载方式和除热原程序参数已确认，干燥箱可用于QC的日常使用。

12.0 附录索引表

附录号	附录描述	页数
1	验证参与人员签名确认表	1
2	验证前预确认项目表	1
3	验证仪温度探头校正结果	1
4	腔体空载温度分布测试热电偶放置方式	1
5	空载温度分布测定结果	1
6	装载方式，热电偶及内毒素瓶位置	1
7	满载热渗透测试结果	1
8	内毒素挑战测试结果	1

附录1：验证参与人员签名确认表

姓名	公司/部门/职务	签名	培训记录位置

附录2：验证前预确认项目表

执行验证前，确认下列项目已完成，记录相关的文件号和批准日期（如有）：
序号	确认内容	是否完成	相关文件
序号	确认内容	是否完成	文件号（其他编号）	批准日期
1	设备上所有关键仪表（温度传感器、压力传感器等）在校正有效期内	是: 否:
2	设备的安装和运行确认已完成，可进行性能确认。	是: 否:
3		是: 否:








检查人（签名）		日期
复核人（签名）		日期

附录3：验证仪热电偶校正结果

仪器描述/功能
验证仪（数据记录仪）
制造商
型号		系列号
干井
型号		系列号
SIM接线盒
型号		系列号
热电偶
型号
IRTD 智能标准温度探头
型号		系列号
校正日期		校正有效期
将IRTD的校正证书附在此表后。
校正结果
温度分布测定前校正结果：
设定点	可接受标准		符合接受标准（是/否）	签名/日期
200℃	所有热电偶在温度分布测定前的校准结果均应在仪器范围内：热电偶和IRTD的温差应在±0.50℃范围内，并维持至少3分钟。
250℃
280℃
PQ测完成后的校正：
250℃	确认后的校正时，不得有1支以上的验证温度探头超出校准范围。
验证仪所生成的所有设置和校正报告附在此表后。
备注
如果为否，输入偏差情况编号____________ 任何缺陷参见并记录于异常情况总结表。

附录4：腔体空载温度分布测定时的热电偶放置方式

备注：使用12支探头进行温度分布测定。

探头1、2、3、4#：腔体上层的四个角

探头5、6、7#：腔体中层

探头8、9、10、11#：腔体下层的四个角

探头12#：位于腔体内置温度探头旁。

附录5：腔体空载温度分布测定结果

参数	接受标准	观察结果
		第一次		第二次	第三次
程序参数	温度: 250°C 时间: 45min
测试日期	N/A
保持时间内设备内置探头的最低温度	腔体预设温度点偏差±15℃ （250±15.0℃）
保持时间内设备内置探头的最高温度
保持时间内设备探头的温差（最低/最高）	≤15.0℃
保持时间内验证仪热电偶的最低温度(探头号)	腔体预设温度点偏差±15℃ （250±15.0℃）
保持时间内验证仪热电偶的最高温度(探头号)
保持时间内验证仪热电偶的温差（最低/最高）	≤15.0℃
保持时间内设备温度探头与邻近热电偶之间的最大温差	不超过 ±1.0℃
合格/失败
备注
如果为否，输入异常情况编号___________ 任何缺陷参见并记录于异常情况总结表。
操作人（签名/日期）			复核人（签名/日期）

将验证仪打印的时间、温度数据和曲线附在表后。

附件6：装载方式，热电偶及内毒素瓶子位置图

装载	满载
装载方式号
装载详细内容

附录7：满载热渗透测定结果

参数	接受标准	结果
		第一次		第二次	第三次
程序参数	温度: 250°C 时间: 45min
测试日期	N/A
保持时间内设备内置探头的最低温度	腔体预设温度点偏差±15℃ （250±15.0℃）
保持时间内设备内置探头的最高温度
保持时间内验证仪热电偶的最低温度(探头号)	腔体预设温度点偏差±15℃ （250±15.0℃）
保持时间内验证仪热电偶的最高温度(探头号)
保持时间内设备温度探头与邻近热电偶之间的最大温差	不超过 ±1.0℃
F_H值（最低）	温度: 250°C 时间: 45min
合格/失败
备注
如果为否，输入异常情况编号任何缺陷参见并记录于异常情况总结表。
操作人（签名/日期）			复核人（签名/日期）