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伊红美蓝培养基
山东拓普生物工程有限公司
Shandong Tuopu Biol-Engineering Co.,Ltd
伊红美蓝培养基(eosin-methylene blue medium,简称EMB medium),一般用于检测大肠杆菌。
伊红为酸性染料,美蓝为碱性染料。
伊红美蓝琼脂培养基在药典中又名曙红亚甲蓝琼脂培养基。
鉴定方法
用伊红美蓝培养基鉴定水中大肠杆菌
步骤如下:
①制作伊红美蓝培养基,趁热注入培养皿中,凝成平板,待用。
②用灭过菌的锥形瓶盛取河水或沟水,按1:10稀释。
③取0.1毫升稀释液接种于伊红美蓝培养基上。用平板划线分离法进行分离。
④将划线后的培养皿倒置37℃温箱中培养18~24小时。培养基中会出现大肠杆菌菌落,菌落中心呈暗蓝黑色,发金属光泽。
⑤将菌落接种于斜面培养基上(由营养琼脂培养基制成)。
配置方法
配方
蛋白胨 10g
乳糖 10g
磷酸氢二钾 2g
琼脂 20~30g
蒸馏水 1000ml
2%伊红水溶液 20ml
0.5 %美蓝水溶液 13ml
先将琼脂加至900ml蒸馏水,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨,混匀使之溶解,再以蒸馏水补足至1000ml,调整PH为7.2~7.4。趁热用脱脂棉或绒布过滤,再加入乳糖,混匀后定量分装于烧瓶内,置高压蒸汽灭菌器内以115℃灭菌20min,贮存于冷暗处备用。
制法
将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正PH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板。