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293细胞

[所属分类:公司新闻] [发布时间:2021-4-7] [发布人: ] [阅读次数:] [返回]

山东拓普生物工程有限公司

Shandong Tuopu Biol-Engineering Co.,Ltd

293细胞是人肾上皮细胞系，有多种衍生株，比如HEK293，293T/17等，来源都是人胚胎肾细胞，其极少表达细胞外配体所需的内生受体，且比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。

293T细胞由293细胞通过基因技术派生出的细胞系，是经过腺病毒E1A基因的转染，能表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区。许多真核表达载体如pcDNA3.1中含有SV40病毒的复制起始位点，可以在表达SV40病毒T抗原的细胞系中复制，从而提高外源基因的表达水平。因此293T细胞广泛应用于病毒包装。用磷酸钙转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。

形态特点

上皮细胞

致瘤性 +

产物或抗原大T抗原

染色体核型亚三倍体人细胞系。染色体众数为64，30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der⑴t(1;15) (q42;q13)，der⒆t(3;19) (q12;q13)，der⑿t(8;12) (q22;p13)，还有四条标记染色体，有的细胞另有5条标记染色体。der⑴与M8 (or Xq+)常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体，两条Xq+，一条Xp+。

细胞名称	293 和 293T
种属	人
组织来源
形态特点	上皮细胞
致瘤性	+
产物或抗原	大T抗原
染色体核型	亚三倍体人细胞系。染色体众数为64，30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der⑴t(1;15) (q42;q13)，der⒆t(3;19) (q12;q13)，der⑿t(8;12) (q22;p13)，还有四条标记染色体，有的细胞另有5条标记染色体。der⑴与M8 (or Xq+)常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体，两条Xq+，一条Xp+。
生长特性	粘附
文献评价	293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞。[RF32725] 表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725] 早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764]，现已清楚仅含有左端序列。[RF50113] 此细胞系人腺病毒滴度高。室温不贴壁，37℃几日后重新贴壁。表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体. [RF33793] The Ad5 insert was cloned and sequenced,and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2).
传代	293:弃培养基，含0.25% 胰酶，0.03% EDTA 消化液洗涤，弃去，加1-2ml消化液室温或37℃消化。加入新鲜培养基，吸出，分到新培养皿中。一传二至一传四。 293T:生长快，通常倍增时间不到一天。每3~4 天1:10至1:20稀释，5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶过度消化。
培养基更换	每2-3天一次
冻存液	95%培养基;5%,DMSO;culture medium 95%; DMSO,5%;50%培养液，10%DMSO, 40%血清。
培养条件	ATCC培养基:90%的MEM Eagle，加入2mM L-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氢钠，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠;10%加热灭活的马血清 37℃培养

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