红细胞裂解液

[所属分类:公司新闻] [发布时间:2021-4-12] [发布人: ] [阅读次数:] [返回]

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红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer,或称 ACK Lysis Buffer)是一种去除红细胞最简便易行的方法，即用裂解液裂解红细胞，它既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法，主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含红细胞，可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和提取等。

定义

红细胞裂解液是一种去除红细胞最简便易行的方法，即用裂解液裂解红细胞，它既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含红细胞，可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和提取等。

保存条件

2-8℃保存。

使用说明

组织细胞样品：

1.新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液，离心弃去上清液。

2.从4℃冰箱中取出ELS裂解液，按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml细胞压积加入3-5ml裂解液），轻轻吹打混匀；

3.800-1000rpm离心5-8分钟，离心弃去上层红色清液；

4.收集沉淀部分，加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次；

5.如裂解不完全可重复步骤2和3；

6.重悬细胞，用于后续实验；如提取RNA，最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液中进行。

血细胞

1.新鲜抗凝血，离心弃去上清液；

2.取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液，按1:6-10的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml细胞压积加入6-10ml裂解液），轻轻吹打混匀；

3.800-1000rpm离心5-8分钟，离心弃去上层红色清液；

4.收集沉淀部分，加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次；

5.如裂解不完全可重复步骤2和3；

6.重悬细胞，用于后续实验；如提取RNA，最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液进行。

作用原理

细胞裂解液一般都用得是含酶的,在血红细胞表面上有红细胞专署的表面抗原,当裂解液中含可以攻击特定红细胞表面抗原的酶的时候 就只会造成红细胞的变形,生物通道扩大,膨胀,裂解,或者引起红细胞的变性.而不会攻击其他细胞.另外红细胞有自己的电负性,渗透脆性(通常是一些非酶细胞裂解液的突破点) ,悬浮稳定性,这都是区别于其他种类细胞的区别点.红细胞裂解液就是利用这些特性裂解红细胞的.另外红细胞裂解液不能达到100% 准确的裂解红细胞,总会或多或少导致其他种类细胞的裂解.