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什么是血清学反应？有哪些方面的应用？
[所属分类:行业动态] [发布时间:2021-4-30] [发布人:李佳颐] [阅读次数:] [返回]
什么是血清学反应？有哪些方面的应用？
山东拓普生物工程有限公司 http://www.topbiol.com
一、血清学反应的概念及一般特点 抗原及相应抗体在体内或体外均能发生特异性结合，在体外结合能发生可见免疫反应。由于抗体主要存在于血清中，故称为血清学反应。血清学反应根据抗原性质、反应条件、参与反应物质，则表现出反应有多种多样。其反应一般的特点是：（一）特异性和交叉性 血清学反应具有高度特异性。由于抗原决定簇的组成、结构以及排列不同，所诱导产生的抗体也不同。抗原只能与相应抗体结合，而不能与其他抗体相结合，如抗猪瘟抗体只能与猪瘟病毒相结合，而不能与口蹄疫病毒相结合。 生物体的组成是复杂的，包含有多种抗原成分，在进化过程中形成不同的种类，有各不相同的特异性抗原，在亲缘种系中往往含有部分相同的抗原成分，能引起交叉反应。例如，鼠伤寒沙门氏菌血清呢感凝集肠炎沙门氏菌；肠炎沙门氏菌抗血清能凝集鼠伤寒沙门氏菌。交叉反应程度愈高，则亲缘愈近，可用于作亲缘测定。（二）结合的可逆性 抗原抗体结合是分子表面结合，这一结合受理化因素的影响，当温度超过60?C或pH降至3以下时，则抗原抗体复合物又重新离群。离群后的抗原、抗体，其理化性质、免疫活能保留。利用抗原抗体结合的可逆性，可进行免疫媳妇层析，纯化抗原或抗体。（三）最适比与带现象 抗原与抗体结合，其比例适当时才可出现可见反应。抗体除gM具有10个结合点，分泌型IgA具有4个结合位点外，一般抗体都含有两个结合位点（二价）；抗原则根据分子大小，有10-50个不等的结合点。当抗原抗体比例适当时，两者结合后，尚有为饱和的结合点，可以继续与游离的抗体、抗原或与抗原抗体的结合物的未饱和点相联结，逐渐形成愈来愈大的复合物，出现了肉眼可见反应。比例最适合，出现反应最快，反应产物愈多。 如果抗原或抗体过多，抗体和抗原结合点的聚合一开始时即达到饱和，形成小的复合物则不能继续与相邻抗原、抗体结合，不出现可见反应，谓之区带现象或带现象。抗体过剩而出现的抑制带，称为前带。在凝聚反应中，固定抗原，稀释抗体，前几管常常出现抗体过剩的前带现象。抗原过剩出现的抑制带，称为后带。在沉淀反应时，固定血清，稀释抗原，常出现后带现象。为了避免血清学反应的带现象，需要将抗原或抗体作适当的稀释。（四）反应的阶段性 抗原与抗体进行结合，可分为四个阶段：第一阶段为抗原与抗体的特异性结合阶段，反应快，几秒钟至几分钟即完成，但无可见反应；第二阶段为抗原与抗体的反应可见阶段，表现为凝集、沉淀、补体结合等，反应进行较慢，需几分钟或更久。第二阶段受电解质、温度、pH值等影响。两个阶段在反应进行中无严格界限。（五）影响反应的因素 1.电解质 特异性抗原与抗体表面均带有许多极性集团，它们相互结合而失去亲水性，变成疏水系统。此时易受电解质作用失去电荷而互相凝集，发生凝集或沉淀反应。因此，血清学反应须在适当浓度的电解质参与下，才出现可见反应。在凝集、沉淀反应操作时，一般用生理盐水或8%—10%高渗盐水作稀释，才出现较强反应。 2.温度 温度升高，可增加抗原与抗体分子运动而碰撞接触，加速反应的出现，故通常将抗原抗体混合后，放置37?C温箱或水浴箱中，保持一定时间，促进反应。温度高，加速反应；温度低，反应时间延长，但反应结合充分，故在补体结合反应、免疫吸附实验中，采用的低温中放置过夜。 3.酸碱度 血清学反应通常用pH6～8，过酸或过碱都可使复合物离群，pH值在等电点时，可引起非特异凝集。
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一、血清学反应的概念及一般特点 抗原及相应抗体在体内或体外均能发生特异性结合，在体外结合能发生可见免疫反应。由于抗体主要存在于血清中，故称为血清学反应。血清学反应根据抗原性质、反应条件、参与反应物质，则表现出反应有多种多样。其反应一般的特点是：（一）特异性和交叉性 血清学反应具有高度特异性。由于抗原决定簇的组成、结构以及排列不同，所诱导产生的抗体也不同。抗原只能与相应抗体结合，而不能与其他抗体相结合，如抗猪瘟抗体只能与猪瘟病毒相结合，而不能与口蹄疫病毒相结合。 生物体的组成是复杂的，包含有多种抗原成分，在进化过程中形成不同的种类，有各不相同的特异性抗原，在亲缘种系中往往含有部分相同的抗原成分，能引起交叉反应。例如，鼠伤寒沙门氏菌血清呢感凝集肠炎沙门氏菌；肠炎沙门氏菌抗血清能凝集鼠伤寒沙门氏菌。交叉反应程度愈高，则亲缘愈近，可用于作亲缘测定。（二）结合的可逆性 抗原抗体结合是分子表面结合，这一结合受理化因素的影响，当温度超过60?C或pH降至3以下时，则抗原抗体复合物又重新离群。离群后的抗原、抗体，其理化性质、免疫活能保留。利用抗原抗体结合的可逆性，可进行免疫媳妇层析，纯化抗原或抗体。（三）最适比与带现象 抗原与抗体结合，其比例适当时才可出现可见反应。抗体除gM具有10个结合点，分泌型IgA具有4个结合位点外，一般抗体都含有两个结合位点（二价）；抗原则根据分子大小，有10-50个不等的结合点。当抗原抗体比例适当时，两者结合后，尚有为饱和的结合点，可以继续与游离的抗体、抗原或与抗原抗体的结合物的未饱和点相联结，逐渐形成愈来愈大的复合物，出现了肉眼可见反应。比例最适合，出现反应最快，反应产物愈多。 如果抗原或抗体过多，抗体和抗原结合点的聚合一开始时即达到饱和，形成小的复合物则不能继续与相邻抗原、抗体结合，不出现可见反应，谓之区带现象或带现象。抗体过剩而出现的抑制带，称为前带。在凝聚反应中，固定抗原，稀释抗体，前几管常常出现抗体过剩的前带现象。抗原过剩出现的抑制带，称为后带。在沉淀反应时，固定血清，稀释抗原，常出现后带现象。为了避免血清学反应的带现象，需要将抗原或抗体作适当的稀释。（四）反应的阶段性 抗原与抗体进行结合，可分为四个阶段：第一阶段为抗原与抗体的特异性结合阶段，反应快，几秒钟至几分钟即完成，但无可见反应；第二阶段为抗原与抗体的反应可见阶段，表现为凝集、沉淀、补体结合等，反应进行较慢，需几分钟或更久。第二阶段受电解质、温度、pH值等影响。两个阶段在反应进行中无严格界限。（五）影响反应的因素 1.电解质 特异性抗原与抗体表面均带有许多极性集团，它们相互结合而失去亲水性，变成疏水系统。此时易受电解质作用失去电荷而互相凝集，发生凝集或沉淀反应。因此，血清学反应须在适当浓度的电解质参与下，才出现可见反应。在凝集、沉淀反应操作时，一般用生理盐水或8%—10%高渗盐水作稀释，才出现较强反应。 2.温度 温度升高，可增加抗原与抗体分子运动而碰撞接触，加速反应的出现，故通常将抗原抗体混合后，放置37?C温箱或水浴箱中，保持一定时间，促进反应。温度高，加速反应；温度低，反应时间延长，但反应结合充分，故在补体结合反应、免疫吸附实验中，采用的低温中放置过夜。 3.酸碱度 血清学反应通常用pH6～8，过酸或过碱都可使复合物离群，pH值在等电点时，可引起非特异凝集。
