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诱导体细胞胚发生的基本条件

[所属分类:行业动态] [发布时间:2021-6-3] [发布人:网站管理员2] [阅读次数:] [返回]

诱导体细胞胚发生的基本条件
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生长素
Halperin与Wetherell(1964)首先认为生长素是诱导体细胞胚胎发生的主要控制因子，所用生长素的种类，因植物种类而异。从大多数的报道看，一般都采用2，4-D，但也有例外，如 Jelaska(1974)在南瓜体细胞胚的诱导中，采用NAA与IBA(吲哚丁酸)，效果显著好于2，4-D。Mullins等(1976)在葡萄中所用的激素是β-萘氧乙酸(β-NOA浓度为 5-25μM)及苄基腺嘌呤(BAP浓度为5-10μM)。Hidmichi.M.等(1979)在茄子下胚轴中用的是NAA，浓度为 8.0mg/l。
有人研究体细胞胚胎发生中不同阶段与生长素之间的关系，认为在诱发产生胚性细胞时，需要高浓度的生长素，当胚性细胞经球形胚、心形胚、鱼雷形胚等不同阶段发育成为成熟胚的过程中，所要求的生长素浓度要低，而成熟胚在发育成植株时则完全不需要生长素。从胚性细胞到植株这一发育过程中，生长素浓度过高，反而会抑制体细胞胚的发育或产生畸形胚。
最近国外在柑桔、白菜和胡萝卜的组织培养中发现一些愈伤组织，不需要任何外源激素就能继代培养，并发生体细胞胚。我国在甘蔗、葡萄等植物中，也发现过类似的情况，这种组织叫做驯化组织。驯化组织很可能是在培养过程中发生的一种突变细胞，它们在激素方面具有自养的能力，也就是说驯化组织的细胞能合成本身所需要的内源激素。
还原氮
多数研究者认为供应愈伤组织以充足的还原氮是体细胞胚胎发生的第二个基本条件。Halperin(1966)首先认为体细胞胚胎发生需要还原氮。Wetherell与Dougall(1976)根据他们的研究证实了Halperin的看法，他们以浓度为5-55mM的硝酸盐作唯一氮源时，每培养物平均只发生一个胚，当培养基中加入0.1mM的氯化铵时就能促进胚的形成，如用40 mM硝酸钾及30mM氯化铵这一配比，对愈伤组织的生长及胚胎发生都比较合适。他们还认为谷氨胱胺与丙氨酸能作为胚胎发生与生长的唯一氮源。最近 Dougall与 Verma(1978)证明，如果能在培养过程中控制pH，使其保持在5.4左右，那么野生胡萝卜的悬浮培养能以氨作为唯一氮源。
显然，许多植物在体细胞胚生成过程中都需要还原氮，但也有例外，如芹菜就不需要还原氮。
其它因子
通常认为细胞分裂素是体细胞胚胎发生的抑制剂，然而已有实例证明，这种意见至少并不具有普遍意义。在某些实例中，细胞分裂素甚至对体细胞胚胎发生能起促进作用，而且不同的细胞分裂素其作用也不尽相同，例如低浓度的玉米素，能刺激胡萝卜悬浮培养液中的胚胎发生，但相应浓度的激动素或BAP却抑制此过程，而在芹菜中，情况恰好相反，低浓度的激动素能促进其胚胎发生。
一般认为高浓度的钾，能促进愈伤组织的组织化程度，因此常有利于胚胎发生。
另外，steward等人还认为在自然情况下，合子胚一般在子房内发育，其环境是黑暗，而且空气不太流通，因此给于这样条件也有利于体细胞胚的发生与发育。

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