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HJ 347.2-2018 水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法

[所属分类:技术资料] [发布时间:2019-3-1] [发布人:管理员] [阅读次数:] [返回]
中华人民共和国国家环境保护标准
HJ 347.2-2018
部分代替 HJ/T 347-2007
水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法
Water quality—Determination of fecal coliform—Manifold zymotechnics
( 发布稿)
本电子版为发布稿。 请以中国环境出版集团出版的正式标准文本为准。
2018-12-26 发布 2019-06-01 实施

生 态 环 境 部 发 布

目 次
前 言.................................................................................................................................................ii
1
适用范围.......................................................................................................................................1
2
规范性引用文件...........................................................................................................................1
3
术语和定义...................................................................................................................................1
4
方法原理.......................................................................................................................................1
5
干扰和消除...................................................................................................................................2
6
试剂和材料...................................................................................................................................2
7
仪器和设备...................................................................................................................................3
8
样品...............................................................................................................................................3
9
分析步骤.......................................................................................................................................4
10
结果计算与表示.........................................................................................................................5
11
精密度和准确度.........................................................................................................................6
12
质量保证和质量控制.................................................................................................................6
13
废物处理.....................................................................................................................................7
附录 A( 资料性附录) 最大可能数( MPN) 表............................................................................8
附录 B( 资料性附录) 粪大肠菌群检验记录及报告推荐格式.................................................. 12
前 言
为贯彻《 中华人民共和国环境保护法》 和《 中华人民共和国水污染防治法》 , 保护生态
环境, 保障人体健康, 规范水中粪大肠菌群的测定方法, 制定本标准。
本标准规定了测定地表水、 地下水、 生活污水和工业废水中粪大肠菌群的多管发酵法。
本标准是对《 水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法( 试行)》 (
HJ/T 347-2007)
多管发酵法部分的修订。
本标准首次发布于
2007 年, 原起草单位为中国环境监测总站。 本次为第一次修订。
本次修订的主要内容如下:
——完善了方法原理的表述;
——增加了 12 管法和 15 管法的检出限;
——分析步骤中增加了 12 管法, 完善了样品稀释方法;
——增加了规范性引用文件、 术语和定义、 干扰和消除、 仪器和设备、 样品采集、 样品
保存、 精密度和准确度、 质量保证和质量控制、 废物处理等章节;
——将 MPN 表移至附录中。
自本标准实施之日起, 《 水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法( 试行)》
(
HJ/T 347-2007) 废止。
本标准的附录
A和附录B为资料性附录。
本标准由生态环境部生态环境监测司、 法规与标准司组织制订。
本标准起草单位: 辽宁省环境监测实验中心。
本标准验证单位: 大连市环境监测中心、 丹东市环境监测中心站、 锦州市环境监测中心
站、 辽阳市环境监测站、 沈阳市疾病预防控制中心和辽宁北方环境检测技术有限公司。
本标准生态环境部
2018年12月26日批准。
本标准自
2019年6月1日起实施。
本标准由生态环境部解释。

1
水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法
1 适用范围
本标准规定了测定水中粪大肠菌群的多管发酵法。
本标准适用于地表水、 地下水、 生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。
本方法的检出限:
12 管法为 3 MPN/L; 15 管法为 20 MPN/L。
2 规范性引用文件
本标准引用了下列文件或其中的条款。 凡是不注日期的引用文件, 其有效版本适用于本
标准。
GB/T 14581 水质 湖泊和水库采样技术指导
HJ 494 水质 采样技术指导
HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1
粪大肠菌群 fecal coliforms
又称耐热大肠菌群( thermotolerant coliforms)。 44.5℃培养 24 h, 能发酵乳糖产酸产气
的需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
3.2
最大可能数 most probable number( MPN)
又称稀释培养计数, 是一种基于泊松分布的间接计数法。 利用统计学原理, 根据一定体
积不同稀释度样品经培养后产生的目标微生物阳性数, 查表估算一定体积样品中目标微生物
存在的数量( 单位体积存在目标微生物的最大可能数)。
4 方法原理
将样品加入含乳糖蛋白胨培养基的试管中, 37℃初发酵富集培养, 大肠菌群在培养基中
生长繁殖分解乳糖产酸产气, 产生的酸使溴甲酚紫指示剂由紫色变为黄色, 产生的气体进入
倒管中, 指示产气。
44.5℃复发酵培养, 培养基中的胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长,
最后产气的细菌确定为是粪大肠菌群。 通过查
MPN 表, 得出粪大肠菌群浓度值。
5 2
干扰和消除
5.1
活性氯具有氧化性, 能破坏微生物细胞内的酶活性, 导致细胞死亡, 可在样品采集 ( 8.1)
时加入硫代硫酸钠溶液(
6.7) 消除干扰。
5.2 重金属离子具有细胞毒性, 能破坏微生物细胞内的酶活性, 导致细胞死亡, 可在样品
采集(
8.1) 时加入乙二胺四乙酸二钠溶液( 6.8) 消除干扰。
6 试剂和材料
除非另有说明, 分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂或生物试剂, 实验用水为蒸馏
水或去离子水。
6.1 乳糖蛋白胨培养基。
蛋白胨
10 g
牛肉浸膏 3 g
乳糖 5 g
氯化钠 5 g
1.6%
溴甲酚紫乙醇溶液 1 ml
将蛋白胨、 牛肉浸膏、 乳糖、 氯化钠加热溶解于 1000 ml 水中, 调节 pH 至 7.2~7.4,
再加入
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1 ml, 充分混匀, 分装于含有倒置小玻璃管的试管中, 115℃
高压蒸汽灭菌
20 min, 储存于冷暗处备用。 也可选用市售成品培养基。
6.2 三倍乳糖蛋白胨培养基: 称取三倍的乳糖蛋白胨培养基( 6.1) 成分的量, 溶于 1000 ml
水中, 配成三倍乳糖蛋白胨培养基, 配制方法同上。
6.3 EC 培养基。
胰胨
20 g
乳糖 5 g
胆盐三号 1.5 g
磷酸氢二钾 4 g
磷酸二氢钾 1.5 g
氯化钠 5 g
将上述成分或含有上述成分的市售成品加热溶解于 1000 ml 水中, 然后分装于有玻璃倒
管的试管中,
115℃高压蒸汽灭菌 20 min, 灭菌后 pH 值应在 6.9 左右。
注: 配制好的培养基( 6.1~6.3) 避光、 干燥保存, 必要时在 5℃±3℃冰箱中保存, 通常瓶装及试管
装培养基不超过 3~6 个月。 配制好的培养基要避免杂菌侵入和水分蒸发, 当培养基颜色变化,
或体积变化明显时废弃不用。
6.4 无菌水: 取适量实验用水, 经 121℃高压蒸汽灭菌 20 min, 备用。
6.5 硫代硫酸钠( Na2S2O3·5H2O)。
6.6 乙二胺四乙酸二钠( C10H14N2O8Na2·2H2O)。
6.7 硫代硫酸钠溶液: ρ( Na2S2O3) =0.10 g/ml
称取 15.7 g 硫代硫酸钠( 6.5), 溶于适量水中, 定容至 100 ml, 临用现配。
3
6.8 乙二胺四乙酸二钠溶液: ρ( C10H14N2O8Na2·2H2O) =0.15 g/ml
称取 15 g 乙二胺四乙酸二钠( 6.6), 溶于适量水中, 定容至 100 ml, 此溶液可保存 30 d。
7 仪器和设备
7.1
采样瓶: 500 ml 带螺旋帽或磨口塞的广口玻璃瓶。
7.2 高压蒸汽灭菌器: 115℃、 121℃可调。
7.3 恒温培养箱或水浴锅: 允许温度偏差 37℃±0.5℃、 44℃±0.5℃。
7.4 pH 计: 准确到 0.1 pH 单位。
7.5 接种环: 直径 3 mm。
7.6 试管: 300 ml、 50 ml、 20 ml。
7.7 一般实验室常用仪器和设备。
注: 玻璃器皿及采样器具试验前要按无菌操作要求包扎, 121℃高压蒸汽灭菌 20 min 备用。
8 样品
8.1 样品采集
点位布设及采样频次按照 GB/T 14581、 HJ/T 494 和 HJ/T 91 的相关规定执行。
采集微生物样品时, 采样瓶(
7.1) 不得用样品洗涤, 采集样品于灭菌的采样瓶中。 清
洁水体的采样量不低于
400 ml, 其余水体采样量不低于 100 ml。
采集河流、 湖库等地表水样品时, 可握住瓶子下部直接将带塞采样瓶插入水中, 约距水
面
10~15 cm 处, 瓶口朝水流方向, 拔瓶塞, 使样品灌入瓶内然后盖上瓶塞, 将采样瓶从水
中取出。 如果没有水流, 可握住瓶子水平往前推。 采样量一般为采样瓶容量的
80%左右。 样
品采集完毕后, 迅速扎上无菌包装纸。
从龙头装置采集样品时, 不要选用漏水龙头, 采水前将龙头打开至最大, 放水
3~5 min,
然后将龙头关闭, 用火焰灼烧约
3 min 灭菌或用 70%~75%的酒精对龙头进行消毒, 开足龙
头, 再放水
1 min, 以充分除去水管中的滞留杂质。 采样时控制水流速度, 小心接入瓶内。
采集地表水、 废水样品及一定深度的样品时, 也可使用灭菌过的专用采样装置采样。
在同一采样点进行分层采样时, 应自上而下进行, 以免不同层次的搅扰。
如果采集的是含有活性氯的样品, 需在采样瓶灭菌前加入硫代硫酸钠溶液(
6.7), 以除
去活性氯对细菌的抑制作用( 每
125 ml 容积加入 0.1 ml 的硫代硫酸钠溶液); 如果采集的是
重金属离子含量较高的样品, 则在采样瓶灭菌前加入乙二胺四乙酸二钠溶液(
6.8), 以消除
干扰( 每
125 ml 容积加入 0.3 ml 的乙二胺四乙酸二钠溶液)。
注: 15.7 mg 硫代硫酸钠( 6.5) 可去除样品中 1.5 mg 活性氯, 硫代硫酸钠用量可根据样品实际活性氯
量调整。
8.2 样品保存
采样后应在 2 h 内检测, 否则, 应 10℃以下冷藏但不得超过 6 h。 实验室接样后, 不能
立即开展检测的, 将样品于
4℃以下冷藏并在 2 h 内检测。
9 4
分析步骤
9.1 样品稀释及接种
9.1.1 15 管法
将样品充分混匀后, 在 5 支装有已灭菌的 5 ml 三倍乳糖蛋白胨培养基( 6.2) 的试管中
( 内有倒管), 按无菌操作要求各加入样品
10 ml, 在 5 支装有已灭菌的 10 ml 单倍乳糖蛋白
胨培养基(
6.1) 的试管中( 内有倒管), 按无菌操作要求各加入样品 1 ml, 在 5 支装有已灭
菌的
10 ml 单倍乳糖蛋白胨培养基( 6.1) 的试管中( 内有倒管), 按无菌操作要求各加入样
品
0.1 ml。
对于受到污染的样品, 先将样品稀释后再按照上述操作接种, 以生活污水为例, 先将样
品稀释
104 倍, 然后按照上述操作步骤分别接种 10 ml、 1 ml 和 0.1 ml。 15 管法样品接种量
参考表见表
1。
当样品接种量小于
1 ml 时, 应将样品制成稀释样品后使用。 按无菌操作要求方式吸取
10 ml 充分混匀的样品, 注入盛有 90 ml 无菌水( 6.4) 的三角烧瓶中, 混匀成 1:10 稀释样品。
吸取
1:10 的稀释样品 10 ml 注入盛有 90 ml 无菌水的三角烧瓶中, 混匀成 1:100 稀释样品。
其他接种量的稀释样品依次类推。
注: 吸取不同浓度的稀释液时, 每次必须更换移液管。
生活饮用水等清洁水体也可使用 12 管法。
表 1 15 管法样品接种量参考表

样品类型 接种量( ml)
10 1 0.1 10-2 10-3 10-4 10-5
地表水 水源水 ▲ ▲ ▲
湖泊( 水库) ▲ ▲ ▲
河流 ▲ ▲ ▲
废水 生活污水 ▲ ▲ ▲
工业废水 处理前 ▲ ▲ ▲
处理后 ▲ ▲ ▲
地下水 ▲ ▲ ▲

9.1.2 12 管法
将样品充分混匀后, 在 2 支装有已灭菌的 50 ml 三倍乳糖蛋白胨培养基( 6.2) 的大试管
中( 内有倒管), 按无菌操作要求各加入样品
100 ml, 在 10 支装有已灭菌的 5 ml 三倍乳糖
蛋白胨培养基(
6.2) 的试管中( 内有倒管), 按无菌操作要求各加入样品 10 ml。
5
9.2 初发酵试验
将接种( 9.1) 后的试管, 在 37℃±0.5℃下培养 24 h±2 h。
发酵试管颜色变黄为产酸, 小玻璃倒管内有气泡为产气。 产酸和产气的试管表明试验阳
性。 如在倒管内产气不明显, 可轻拍试管, 有小气泡升起的为阳性。
9.3 复发酵试验
轻微振荡在初发酵试验( 9.2) 中显示为阳性或疑似阳性( 只产酸未产气) 的试管, 用
经火焰灼烧灭菌并冷却后的接种环(
7.5) 将培养物分别转接到装有 EC 培养基( 6.3) 的试
管中。 在
44.5℃±0.5℃下培养 24 h±2 h。 转接后所有试管必须在 30 min 内放进恒温培养箱
或水浴锅(
7.3) 中。 培养后立即观察, 倒管中产气证实为粪大肠菌群阳性。
9.4 对照试验
9.4.1 空白对照
每次试验都要用无菌水( 6.4) 按照步骤 9.1~9.3 进行实验室空白测定。
9.4.2 阳性及阴性对照
将粪大肠菌群的阳性菌株( 如大肠埃希氏菌 Escherichia coli) 和阴性菌株( 如产气肠杆
菌
Enterobacter aerogenes) 制成浓度为 300~3000 MPN/L 的菌悬液, 分别取相应体积的菌
悬液按接种(
9.1) 的要求接种于试管中, 然后按初发酵试验( 9.2) 和复发酵试验( 9.3) 要
求培养, 阳性菌株应呈现阳性反应, 阴性菌株应呈现阴性反应, 否则, 该次样品测定结果无
效, 应查明原因后重新测定。
10 结果计算与表示
10.1 结果计算
接种 12 份样品时, 查附录 A 中表 A.1 可得每升粪大肠菌群 MPN 值。
接种
15 份样品时, 查附录 A 中表 A.2 得到 MPN 值, 再按照公式( 1) 换算样品中粪大
肠菌群数(
MPN/L):
MPN值100
C
f
( 1)
式中:
C——样品中粪大肠菌群数, MPN/L;
MPN 值——每 100 ml 样品中粪大肠菌群数, MPN/100ml;
100——为 10×10 ml, 其中, 10 将 MPN 值的单位 MPN/100 ml 转换为 MPN/L, 10 ml
为 MPN 表中最大接种量;
f——实际样品最大接种量, ml。
10.2 结果表示
测定结果保留至整数位, 最多保留两位有效数字, 当测定结果≥100 MPN/L 时, 以科学
计 6
数法表示; 当测定结果低于检出限时, 12 管法以“未检出” 或“<3 MPN/L” 表示; 15
管法以“未检出” 或“<20 MPN/L” 表示。 粪大肠菌群检验记录及报告推荐格式参见附录
B。
11 精密度和准确度
11.1 精密度
6 个实验室对低浓度( 地下水, 浓度均值为 54 MPN/L) 、 中浓度( 地表水, 浓度均值
为
2.7×104 MPN/L) 和高浓度( 生活污水, 浓度均值为 2.8×107 MPN/L) 三个不同浓度粪
大肠菌群的实际样品和有证标准样品(浓度为
3670 MPN/L, 可接受范围为 330~
7710 MPN/L)进行了 6 次重复测定: 实验室内相对标准偏差范围分别为 2.3%~3.8%、 2.0%~
11%、 1.1%~5.4%和 5.1%~17%; 实验室间相对标准偏差分别为 3.4%、 11%、 1.6%和 5.4%;
实验室间
95%置信区间见表 2。
表 2 实验室间 95%置信区间
低浓度( MPN/L) 中浓度( MPN/L) 高浓度( MPN/L) 有证标准样品( MPN/L)
均值 95%置信区间 均值 95%置信区间 均值 95%置信区间 均值 95%置信区间
54 47~62 2.7×104 9.6×103~
7.9×104
2.8×107 2.2×107~
3.6×107
3725 2413~5751

11.2 准确度
6 个实验室对含粪大肠菌群浓度为 3670 MPN/L( 可接受范围为 330~7710 MPN/L) 的
标准样品进行了
6 次重复测定: 相对误差范围为-6.2%~ 8.4%; 相对误差最终值为
-
1.7%±10.6%。
注: 微生物检测数据为偏态分布, 其测定结果全部经以 10 为底对数转换后进行计算。
12 质量保证和质量控制
12.1 培养基检验
更换不同批次培养基时要进行阳性和阴性菌株检验, 将粪大肠菌群的阳性菌株( 如大肠
埃希氏菌
Escherichia coli) 和阴性菌株( 如产气肠杆菌 Enterobacter aerogenes) 制成浓度为
300~3000 MPN/L 的菌悬液。 若使用的是定性标准菌株, 配制方法为先进行预实验, 摸清浓
度后按目标为
300~3000 MPN/L 稀释; 若使用的是定量标准菌株, 则可按照给定值直接稀
释。 稀释后分别取相应水量的菌悬液按接种(
9.1) 的要求接种于试管中, 然后按初发酵试
验(
9.2) 和复发酵试验( 9.3) 要求培养, 阳性菌株应呈现阳性反应, 阴性菌株应呈现阴性
反应。

7
12.2 对照试验
12.2.1 空白对照
每次试验都要用无菌水做实验室空白测定( 9.4.1), 培养后的试管中不得有任何变色反
应。 否则, 该次样品测定结果无效, 应查明原因后重新测定。
12.2.2 阳性及阴性对照
定期按照 9.4.2 进行阳性及阴性对照试验, 阳性菌株应呈现阳性反应, 阴性菌株应呈现
阴性反应, 否则, 该次样品测定结果无效, 应查明原因后重新测定。
13 废物处理
使用后的废物及器皿须经 121℃高压蒸汽灭菌 30 min 或使用液体消毒剂( 自制或市售)
灭菌。 灭菌后, 器皿方可清洗, 废物作为一般废物处置。

8
附录 A
( 资料性附录)
最大可能数( MPN) 表
表 A.1 12 管法最大可能数( MPN) 表
10 ml 样品量的阳性管数 100 ml 样品量的阳性瓶数
0 1 2
1 L 样品中粪大肠菌群数 1 L 样品中粪大肠菌群数 1 L 样品中粪大肠菌群数
0 <3 4 11
1 3 8 18
2 7 13 27
3 11 18 38
4 14 24 52
5 18 30 70
6 22 36 92
7 27 43 120
8 31 51 161
9 36 60 230
10 40 69 >230
注: 接种 2 份 100 ml 样品, 10 份 10 ml 样品, 总量 300 ml。

表 A.2 15 管法最大可能数( MPN) 表
各接种量阳性份数 MPN/100 ml 95%置信限 各接种量阳性份数 MPN/100 ml 95%置信限
10 ml 1 ml 0.1 ml 下限 上限 10 ml 1 ml 0.1 ml 下限 上限
0 0 0 <2 3 0 0 8 1 19
0 0 1 2 <0.5 7 3 0 1 11 2 25
0 0 2 4 <0.5 7 3 0 2 13 3 31
0 0 3 5 3 0 3 16
0 0 4 7 3 0 4 20
0 0 5 9 3 0 5 23
0 1 0 2 <0.5 7 3 1 0 11 2 25
0 1 1 4 <0.5 11 3 1 1 14 4 34
0 1 2 6 <0.5 15 3 1 2 17 5 46
0 1 3 7 3 1 3 20 6 60


9
续表
各接种量阳性份数 MPN/100 ml 95%置信限 各接种量阳性份数 MPN/100 ml 95%置信限
10 ml 1 ml 0.1 ml 下限 上限 10 ml 1 ml 0.1 ml 下限 上限
0 1 4 9 3 1 4 23
0 1 5 11 3 1 5 27
0 2 0 4 <0.5 11 3 2 0 14 4 34
0 2 1 6 <0.5 15 3 2 1 17 5 46
0 2 2 7 3 2 2 20 6 60
0 2 3 9 3 2 3 24
0 2 4 11 3 2 4 27
0 2 5 13 3 2 5 31
0 3 0 6 <0.5 15 3 3 0 17 5 46
0 3 1 7 3 3 1 21 7 63
0 3 2 9 3 3 2 24
0 3 3 11 3 3 3 28
0 3 4 13 3 3 4 32
0 3 5 15 3 3 5 36
0 4 0 8 3 4 0 21 7 63
0 4 1 9 3 4 1 24 8 72
0 4 2 11 3 4 2 28
0 4 3 13 3 4 3 32
0 4 4 15 3 4 4 36
0 4 5 17 3 4 5 40
0 5 0 9 3 5 0 25 8 75
0 5 1 11 3 5 1 29
0 5 2 13 3 5 2 32
0 5 3 15 3 5 3 37
0 5 4 17 3 5 4 41
0 5 5 19 3 5 5 45
1 0 0 2 <0.5 7 4 0 0 13 3 31
1 0 1 4 <0.5 11 4 0 1 17 5 46
1 0 2 6 <0.5 15 4 0 2 21 7 63
1 0 3 8 1 19 4 0 3 25 8 75
1 0 4 10 4 0 4 30
1 0 5 12 4 0 5 36
1 1 0 4 <0.5 11 4 1 0 17 5 46
1 1 1 6 <0.5 15 4 1 1 21 7 63
1 1 2 8 1 19 4 1 2 26 9 78


10
续表
各接种量阳性份数 MPN/100 ml 95%置信限 各接种量阳性份数 MPN/100 ml 95%置信限
10 ml 1 ml 0.1 ml 下限 上限 10 ml 1 ml 0.1 ml 下限 上限
1 1 3 10 4 1 3 31
1 1 4 12 4 1 4 36
1 1 5 14 4 1 5 42
1 2 0 6 <0.5 15 4 2 0 22 7 67
1 2 1 8 1 19 4 2 1 26 9 78
1 2 2 10 2 23 4 2 2 32 11 91
1 2 3 12 4 2 3 38
1 2 4 15 4 2 4 44
1 2 5 17 4 2 5 50
1 3 0 8 1 19 4 3 0 27 9 80
1 3 1 10 2 23 4 3 1 33 11 93
1 3 2 12 4 3 2 39 13 110
1 3 3 15 4 3 3 45
1 3 4 17 4 3 4 52
1 3 5 19 4 3 5 59
1 4 0 11 2 25 4 4 0 34 12 93
1 4 1 13 4 4 1 40 14 110
1 4 2 15 4 4 2 47
1 4 3 17 4 4 3 54
1 4 4 19 4 4 4 62
1 4 5 22 4 4 5 69
1 5 0 13 4 5 0 41 16 120
1 5 1 15 4 5 1 48
1 5 2 17 4 5 2 56
1 5 3 19 4 5 3 64
1 5 4 22 4 5 4 72
1 5 5 24 4 5 5 81
2 0 0 5 <0.5 13 5 0 0 23 7 70
2 0 1 7 1 17 5 0 1 31 11 89
2 0 2 9 2 21 5 0 2 43 15 110
2 0 3 12 3 28 5 0 3 58 19 140
2 0 4 14 5 0 4 76 24 180
2 0 5 16 5 0 5 95
2 1 0 7 1 17 5 1 0 33 11 93
2 1 1 9 2 21 5 1 1 46 16 120


11
续表
各接种量阳性份数 MPN/100
ml
95%置信限 各接种量阳性份数 MPN/100 ml 95%置信限
10 ml 1 ml 0.1 ml 下限 上限 10 ml 1 ml 0.1 ml 下限 上限
2 1 2 12 3 28 5 1 2 63 21 150
2 1 3 14 5 1 3 84 26 200
2 1 4 17 5 1 4 110
2 1 5 19 5 1 5 130
2 2 0 9 2 21 5 2 0 49 17 130
2 2 1 12 3 28 5 2 1 70 23 170
2 2 2 14 4 34 5 2 2 94 28 220
2 2 3 17 5 2 3 120 33 280
2 2 4 19 5 2 4 150 38 370
2 2 5 22 5 2 5 180 44 520
2 3 0 12 3 28 5 3 0 79 25 190
2 3 1 14 4 34 5 3 1 110 31 250
2 3 2 17 5 3 2 140 37 340
2 3 3 20 5 3 3 180 44 500
2 3 4 22 5 3 4 210 53 670
2 3 5 25 5 3 5 250 77 790
2 4 0 15 4 37 5 4 0 130 35 300
2 4 1 17 5 4 1 170 43 490
2 4 2 20 5 4 2 220 57 700
2 4 3 23 5 4 3 280 90 850
2 4 4 25 5 4 4 350 120 1000
2 4 5 28 5 4 5 430 150 1200
2 5 0 17 5 5 0 240 68 750
2 5 1 20 5 5 1 350 120 1000
2 5 2 23 5 5 2 540 180 1400
2 5 3 26 5 5 3 920 300 3200
2 5 4 29 5 5 4 1600 640 5800
2 5 5 32 5 5 5 ≥2400 800
注 1: 接种 5 份 10 ml 样品、 5 份 1 ml 样品、 5 份 0.1 ml 样品。
注
2: 如果有超过三个的稀释度用于检验, 在一系列的十进稀释当中, 计算 MPN 时, 只需要用其中依次三个
的稀释度, 取其阳性组合。 选择的标准是: 先选出
5 支试管全部为阳性的最大稀释(小于它的稀释度也全部为
阳性试管
), 然后再加上依次相连的两个更高的稀释。 用这三个稀释度的结果数据来计算 MPN 值。


附录 B
( 资料性附录)
粪大肠菌群检验记录及报告推荐格式
表 B.1 粪大肠菌群测定检验记录
项目名称: 检验日期: 年 月 日
检验方法 方法依据
灭菌锅型号 出厂编号
培养箱型号 出厂编号
培养基灭菌温度( ℃) 培养温度( ℃)
样品编号:
查表结果: 粪大肠菌群数
MPN/100 ml 稀释度: 结果: MPN/L
标本接种( ml)
初发酵
复发酵
阳性管数( 个)

检验者: 校对: 审核:
注 1: 初发酵和复发酵后面的表格里, 产酸产气的用“ +” 表示, 否则用“—” 表示。
注 2: 可根据实际工作需要自行设计表格, 至少要包括上述信息。
表 B.2 粪大肠菌群测定数据报告
样品来源
采/送样日期 分析日期
样品数量
样品状态
监测点位 样品编号 监测频次
标准方法名称 标准方法编号
测定值: 监测结果:
备注

注: 可根据实际工作需要自行设计表格, 至少要包括上述信息。

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