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微生物限度检查适用性试验

[所属分类:技术资料] [发布时间:2020-1-9] [发布人:] [阅读次数:] [返回]

山东拓普生物工程有限公司

Shandong Tuopu Biol-Engineering Co.,Ltd

微生物限度检查适用性试验

摘要:培养基的质量以及计数方法的选择是微生物检验的基础,关系到检验结果的正确性,为贯彻执行2015新版国家药典,本实验室采取金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌等菌株,通过计数培养基适用性检查和产品计数方法适用性试验,确认本公司检验采用的方法和培养基质量是否符合药典要求,从而确定我们公司微生物检验采用微生物计数法中的平皿法,以及相适应的检测样品的稀释梯度。

关键词:计数培养基适用性检查和产品计数方法适用性试验

我们以公司的一款*剂作为实验品种进行实验,试验如下:

药品微生物限度检查适用性试验记录

 检验编号:J-C-ZBLZJ-TH-1515012

品名(剂型)                                         

                                                    

                                     取样日期           

《中国药典》2015版四部              报告日期              

实验仪器名称

型号

厂家

编号

校验结果或有效期情况

电热鼓风干燥箱

 

 

 

校验有效期内

t      否□

生物安全柜

 

 

 

校验有效期内

t      否□

净化工作台

 

 

 

校验有效期内

t      否□

霉菌培养箱

 

 

 

校验有效期内

t      否□

电热恒温培养箱

 

 

 

校验有效期内

t      否□

隔水培养箱

 

 

 

校验有效期内

t      否□

立式电热压力蒸汽灭菌器

 

 

 

校验有效期内

t      否□

 

检验培养基及缓冲液:

名称

批号

厂家

适用性检查

胰酪大豆胨琼脂培养基

   160912

 

 

 

 


 

 

 

 

 


 

 

 

 

 

 

 

t符合要求    □不符合要求

沙氏葡萄糖琼脂培养基

   161003

 

t符合要求    □不符合要求

 

胰酪大豆胨液体培养基

161011

 

t符合要求    □不符合要求

 

麦康凯液体培养基

   161006

 

t符合要求    □不符合要求

 

麦康凯琼脂培养基

   161007

 

t符合要求    □不符合要求

 

肠道菌增菌液体培养基

   161101

 

□符合要求    □不符合要求

 

紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基

   161103

 

□符合要求    □不符合要求

 

RV沙门菌增菌液体培养基

   161106

□符合要求    □不符合要求

木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基

   161008

□符合要求    □不符合要求

名称

批号

厂家

适用性检查

三糖铁琼脂培养基

   161015

 

 

 

 

 


 

 

□符合要求    □不符合要求

 

0.9%无菌氯化钠溶液

   160913

 

 

□符合要求    □不符合要求

 

 

ph7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液

   161015

 

t符合要求    □不符合要求

 

沙氏葡萄糖液体培养基

   161020

t符合要求    □不符合要求

 

菌液制备:10倍稀释法

 

菌种

代数

 

来源

接种至

菌悬液制备

稀释度

 

浓度

枯草芽孢杆菌{CMCC(B)63501}

 

3

 

 

 

招远拓普生物工程有限公司

 

胰酪大豆胨液体培养基30-35℃ 18-24H

用ph7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成每1ml含菌<100cfu的菌悬液

10-4

 

金黄色葡萄球菌{CMCC(B)26003}

 

3

胰酪大豆胨液体培养基30-35℃ 18-24H

10-7

 

铜绿假单胞菌{CMCC(B)10104}

 

3

胰酪大豆胨液体培养基30-35℃ 18-24H

10-7

 

白色念珠菌{CMCC(F)98001}

 

3

沙氏葡萄糖液体培养基20-25℃   2-3天

10-4

(SDA)

(TSA)

黑曲霉{CMCC(F)98003}

 

3

沙氏葡萄糖琼脂培养基20-25℃

5-7天

用ph7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液将孢子洗脱,再制成同上每1ml含菌<100cfu的菌悬液

10-4

 (SDA)

 (TSA)

供试液制备:

   供试品10ml加ph7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml,混匀,作为1:10的供试液,

按照非无菌产品微生物限度检查法操作规程平皿法检验。

 

   计数方法适用性试验:(1)

 

菌别

方法

 

冲洗量

 

枯草芽孢杆菌

 

平皿法

 

 

 

金黄色葡萄球菌

 

平皿法

铜绿假单胞菌

 

平皿法

白色念珠菌

平皿法

黑曲霉

平皿法

 

计数方法适用性试验:(2)

  

 

  阳性菌

培养时 间

菌液组菌数

试验组菌数

供试品对照组菌数

回收率

枯草芽孢杆菌

TSA

72h

 69

71

 64

68

0

0

0.88

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

金黄色葡萄球菌TSA

72h

76

70

80

78

0

0

1.08

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

铜绿假单胞菌

TSA

72h

74

80

78

70

0

0

0.96

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

白色念珠菌

TSA

120h

77

85

87

77

0

0

1.01

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

黑曲霉

TSA

 

120h

65

75

70

72

0

0

1.01

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

白色念珠菌

SDA

120h

63

74

83

74

0

0

1.14

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

黑曲霉

SDA

 

120h

64

57

69

65

0

0

1.10

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

各菌株回收率=(试验组菌落数-供试品对照组菌落数)÷菌液对照组菌落数

 

结论:本品按《中国药典》2015版四部非无菌产品微生物限度检查,经方法适用性试验,结果可用平皿法进行计数方法检验。稀释梯度为10-110-2均可。


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