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革兰氏染色

[所属分类:技术资料] [发布时间:2020-5-15] [发布人:] [阅读次数:] [返回]

山东拓普生物工程有限公司

Shandong Tuopu Biol-Engineering Co.,Ltd

原理：

革兰氏染色是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，革兰氏染色属复染法，即将标本固定后，先用龙胆紫染色，加碘液媒染后用酒精脱色，再用蕃红复染。关键步骤：

革兰氏染色最为关键的步骤就是脱色，可以说脱色决定了革兰氏染色的成败。虽说革兰氏阳性菌不容易脱色，但如果脱色时间过长，革兰氏阳性菌依然会被脱去颜色而被误认为阴性菌，这对细菌鉴定判读会造成极其重大的影响。因此，脱色必须把握时间，不同标本的脱色时间也应该灵活掌握，这需要深厚的经验来把握才能染出优秀的片子。一般来说，脱色脱至恰好没有看得见的紫色脱下为最佳停止脱色的时机。

注意：脱色应严格按照厂家说明书的具体时间。如果自配试剂，需要自行验证脱色时间。拓普革兰氏染色液使用说明：

【产品名称】S0003革兰氏染色液

【产品规格】5ml×4支/盒

【保存条件】常温

【保存期限】1年

【使用方法】

1、 涂片：将培养的细菌涂片（细菌适量，切不可过于浓厚），干燥，固定，

固定时通过火焰1-2次即可。干燥、固定过程载玻片切不可过热，以载

玻片不烫手为宜。

2、初染：滴加试剂A，覆盖涂片区，染色60秒，水洗，吸水。

3、媒染：滴加试剂B，覆盖涂片区，复染60秒，水洗，吸水。

4、脱色：倾斜载玻片，流加试剂C，脱色40-45秒，水洗，吸水。

5、复染：滴加试剂D，覆盖涂片区，复染60秒，水洗，吸水。

6、镜检：油镜观察。

7、判断：革兰氏阳性细菌呈蓝色-蓝紫色；革兰氏阴性细菌呈紫红色-红色。

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