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如何诱导体细胞胚胎发生

[所属分类:行业动态] [发布时间:2021-6-1] [发布人:网站管理员2] [阅读次数:] [返回]

如何诱导体细胞胚胎发生
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诱导体细胞胚胎发生的程序，因植物种类和取材部位的不同而异，但一般可分为以下几个步骤:
1.取植物的一部分组织(如根、茎、叶的切段或胚等)，用组织培养的方法，先让这些高度分化的组织细胞脱分化，形成愈伤组织，再加以人工培养使其再分化，这个阶段一般采用固体培养方法比液体培养方法好，通常所采用的脱分化试剂是2,4-D，也有采用与2,4-D相类似的生长素药剂(由于2,4-D容易诱发生物包括人体细胞的突变，用时宜谨慎)。有的植物除2,4-D以外，还需要附加少量的细胞分裂素，至于2,4-D的浓度，则因植物而异，一般宜采用较高的浓度。外植体的年龄也很重要，一般幼龄组织因其分化程度较低而较容易产生愈伤组织。
2.用所得的愈伤组织进行悬浮培养，使细胞分散;或者进行固体培养，摇床培养等。
3.将悬浮培养物倒在没有植物激素的固体平面培养基上，再进行固体培养，其中有些胚性细胞就有可能发生体细胞胚。
4.培养愈伤组织时应避光。
体细胞胚胎发生的生化
关于体细胞胚胎发生的生化过程研究很少，而体细胞胚发生的本质却需要详细研究生化过程才能加以揭露。从事生化研究的困难在于必须使体细胞胚在培养过程中能大量发生，而且又要使同一培养物中体细胞胚的发育过程能尽量同步，这两个先决条件，目前已开始在胡萝卜的培养中设法做到，所以现在已有人利用胡萝卜为材料，研究体细胞胚胎发生过程中蛋白质、RNA与DNA的变化。最近Sung等(1980)将胡萝卜未发生体细胞胚的愈伤组织和已发生胚的愈伤组织作了比较，发现有二种特殊的胚性蛋白质决定体细胞胚的发育过程，这两种蛋白质的作用机理究竟是什么?还有待深入研究。

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